产品货号:
ALH180
中文名称:
尿液DNA提取试剂盒
英文名称:
Urine DNA Extraction Kit
产品规格:
50T
发货周期:
1~3天
产品价格:
询价
本制品是专门用于从尿液中提取基因组DNA的试剂盒,提取得到的DNA纯净,可直接用于PCR、DNA甲基化鉴定、癌症检测等。
尿液中DNA来自于尿道中脱落的细胞,用尿液DNA进行分子生物学基础研究和临床诊断有很多特殊的优点:
① 尿液收集物是非介入、无创伤性的。
② 从尿液中提取DNA要比从血液中提取DNA更加简单。
- 操作简单,整个过程室温操作约20分钟,适合大规模样品处理。
- DNA产率女性一般为50~200ng/mL尿液,男性一般为3~50ng/mL尿液。
- 安全无毒,本试剂盒对人体无毒,无腐蚀性和刺激性气味。
组分 | 规格 |
缓冲液UB | 10mL |
结合液CB | 15mL |
抑制物去除液IR | 25mL |
漂洗液WB | 13mL |
洗脱缓冲液EB | 15mL |
蛋白酶K溶液(20mg/mL) | 1mL |
吸附柱AC及收集管(50套) | 50套 |
保存:室温,有效期1年。
- 结合液CB或者抑制物去除液IR低温时可能出现析出和沉淀,可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解,恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
- 蛋白酶K保存在即用型甘油缓冲液中,常温运输。收到后,不超过25℃室温至少保存6个月,4℃保存12个月,-20℃保存2年。
- 避免试剂长时间暴露于空气中发生挥发、氧化、pH值变化,各溶液使用后应及时盖紧盖子。
所有的离心步骤均在室温完成,使用转速可以达到13000rpm的传统台式离心机,如Eppendorf 5415C或者类似离心机。
- 第一次使用前请先在漂洗液WB中加入指定量无水乙醇,充分混匀,加入后请及时在方框打钩标记已加入乙醇,以免多次加入!
- 需要自备异丙醇。
- 开始实验前将需要的水浴先预热到70℃备用。
- 取5~50mL尿液,放入适当大小离心管,3000rpm离心收集细胞沉淀。
- 小心弃上清,加入200μL缓冲液UB重悬细胞。
- 加入20μL蛋白酶K (20mg/mL)溶液,充分混匀,再加入200μL结合液CB,立刻涡旋振荡充分混匀,在70℃放置10分钟。溶液应变清亮。
- 冷却后加入100μL异丙醇,立刻涡旋振荡充分混匀,此时可能会出现絮状沉淀。
- 上述步骤中立刻涡旋或者吹打充分混匀非常重要,混匀不充分严重降低产量,必要时如样品粘稠不易混匀时可以涡旋振荡15秒混匀。
- 将上一步混合物(包括可能有的沉淀)加入一个吸附柱AC中,(吸附柱放入收集管中)13000rpm离心30~60秒,倒掉收集管中的废液。
- 加入500μL抑制物去除液IR,12000rpm离心30秒,弃废液。
- 加入500μL漂洗液WB(请先检查是否已加入无水乙醇!),12000rpm离心30秒,弃掉废液。
- 加入500μL漂洗液WB,12000rpm离心30秒,弃掉废液。
- 将吸附柱AC放回空收集管中,13000rpm离心2分钟,尽量除去漂洗液,以免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。
- 取出吸附柱AC,放入一个干净的离心管中,在吸附膜的中间部位加30μL洗脱缓冲液EB(洗脱缓冲液事先在65~70℃水浴中预热效果更好),室温放置3~5分钟,12000rpm离心1分钟。将得到的溶液重新加入离心吸附柱中,室温放置2分钟,12000rpm离心1分钟。
- 洗脱体积越大,洗脱效率越高,如果需要DNA浓度较高,可以适当减少洗脱体积,但是最小体积不应少于15μL,体积过小降低DNA洗脱效率,减少DNA产量。
- DNA可以存放在2~8℃,如果要长时间存放,可以放置在-20℃。
相关搜索:尿液DNA提取试剂盒,尿液DNA提取,尿液gDNA提取,尿液基因组DNA提取,Urine DNA Extraction Kit